無縫克隆的10 μl反應(yīng)體系中,,2-3 個組裝片段總加入量建議在0.03-0.2 pmol,,4-6 個組裝片段總加入量建議在0.2-0.5 pmol,。
計算線性化片段(包括載體和插入片段)的使用量,,推薦以下計算公式:
線性化片段用量(ng)=皮摩爾數(shù)(pmols) × 堿基對數(shù)(bp)× 0.65 kDa
注:最優(yōu)反應(yīng)體系通常含有載體50-100 ng,,各插入片段的摩爾數(shù)是載體的2-3倍,。
任意輸入兩個參數(shù):線性化片段的用量,、pmols數(shù),、片段堿基對數(shù),,計算第三個參數(shù)結(jié)果,。
(線性化片段)
(堿基對數(shù))
計算結(jié)果 | 線性化片段質(zhì)量 | pmols | 堿基對數(shù) |
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