PCR(聚合酶鏈式反應)技術已成為分子生物學研究必備技能,DNA聚合酶是PCR能否成功的關鍵,。從早期被發(fā)現(xiàn)的Taq DNA聚合酶到現(xiàn)在新酶的發(fā)現(xiàn)和對舊酶的改造,DNA聚合酶的保真性,、特異性,、靈敏度等都獲得了明顯的改進。
隨著相關研究技術的深入和研究樣本越發(fā)復雜,,在基因克隆,、二代測序、定點突變等實驗中,,都面臨著更加嚴苛的PCR結果準確性要求,。因此,對DNA聚合酶的保真性要求日益提高,。超保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,,聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性,可沿 5'→3'方向催化合成 DNA,;酶切中心具有3'→5'外切酶活性,,即校正活性,可以進行堿基錯配的修復,,保證DNA復制的忠實性,。
超保真DNA聚合酶工作原理示意圖
PCR過程中錯配的核苷酸會從聚合中心進入酶切中心被切除(圖a、b),;
切除后此位點會重新結合正確的核苷酸,,繼續(xù)從5’到3’進行精準復制(圖c)。
超保真酶品類繁多,,如何篩選一款適合自己的呢,?
GenStar? SuperNova系列,性價比之王,,專治超保真DNA聚合酶選擇困難癥,。
GenStar? SuperNova系列五大特點
1、保真度超高:保真度是 Taq DNA Polymerase 的80倍,;
2,、延伸速度快:延伸速度約為 15-30 s/kb,不超過 1 min/kb,;
3,、擴增性能優(yōu):長片段擴增能力強,且可高效擴增復雜基因組模板和高 GC 模板,;
4,、模板適用性好:適用于多種物種來源模板的擴增;
5,、應用范圍廣:適用于基因克隆,、高通量測序,、定點突變等;
優(yōu)化的延伸因子,,提高擴增速度和延伸性能
SuperNova DNA Polym-erase延伸速度約為 15-30 s/kb,,簡單模板擴增長度可達20 kb,復雜模板可達13 kb
SuperNova DNA Polymerase擴增效率高
復雜模板(如GC-rich)擴增能力強,,可選擇產品中配備的High-GC Enhancer,,可進一步提高擴增效率
模板適用性廣泛
適用于多物種來源模板的擴增,滿足不同科研需求,。