產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的專用 2× 濃度預(yù)混液,。本產(chǎn)品含有優(yōu)化濃度的 GenStar Fast HSTaq DNA Polymerase,、SYBR Green I、dNTPs,、Mg2+,、反應(yīng)緩沖液和穩(wěn)定劑等成分。主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA 反轉(zhuǎn)錄后 cDNA 靶序列的檢測(cè),。GenStar Fast HSTaq DNA Polymerase 高溫加熱前,，抗 Taq 單克隆抗體與 Taq 結(jié)合,，抑制 Taq 的聚合酶活性，從而抑制在低溫條件下出現(xiàn)的由引物和模板 DNA 非特異性雜交或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增,?？贵w在 PCR 反應(yīng)的預(yù)變性步驟中已完全失活，不會(huì)阻礙之后 Taq 酶聚合反應(yīng),，大大提高了 PCR 反應(yīng)的靈敏度及特異性,。優(yōu)化濃度的 SYBR Green I 熒光染料摻入 DNA 雙鏈后，熒光信號(hào)增強(qiáng),，而不摻入鏈中 SYBR Green I 染料分子熒光信號(hào)不變,，從而保證熒光信號(hào)的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步，熒光可以在退火或延伸階段測(cè)定,。
本產(chǎn)品為 2× 濃度預(yù)混實(shí)時(shí)熒光定量快速 PCR 反應(yīng)體系,，使用時(shí)只需加入模板、引物,、ROX Reference Dye（用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差,，根據(jù)不同熒光定量 PCR 儀選擇使用）和水，使其工作濃度為 1×,，即可進(jìn)行反應(yīng)。具有快速簡(jiǎn)便,、靈敏度高,、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),，可最大限度地減少人為誤差,、節(jié)約 PCR 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間、降低污染機(jī)率,。
產(chǎn)品組分
| 組分貨號(hào) | 組分名稱 | A301-01 | A301-05 | A301-10 |
|---|---|---|---|---|
| ZA301-101 | 2×RealStar Fast SYBR qPCR Mix | 1.1 ml | 1.1 ml×5 | 1.1 ml×10 |
注：不同儀器所需 ROX Reference Dye 不同,，如需添加，需致電本公司或向服務(wù)您的銷售人員索?。?/span>
需加 High ROX Reference Dye (50×) 的機(jī)型：ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和 ABI Step One /ABI StepOne Plus,。
需加 Low ROX Reference Dye (50×) 的機(jī)型：ABI Prism7500 /7500 Fast , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000。
無(wú)需加 ROX Reference Dye 的機(jī)型: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System,，Corbett Rotor-gene 6000, Agilent Technologies Mx3000P 等熒光定量 PCR 儀,。
保存條件
-20℃ 避光保存，保質(zhì)期 24 個(gè)月,，避免反復(fù)凍融,。如果經(jīng)常使用，可置于 4℃ 保存至少 3 個(gè)月,。
產(chǎn)品變更
該產(chǎn)品原英文名稱為：2×RealStar Green Fast Mixture,，原中文名稱為：2× 預(yù)混實(shí)時(shí)熒光定量快速 PCR 反應(yīng)體系,。自 2022.4.12 起變更為現(xiàn)用名。
數(shù)據(jù)展示
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍寬
以 Hela 細(xì)胞 cDNA 為模板,，按10倍濃度梯度稀釋,，根據(jù) Ct 值構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示,，GenStar #A301 擴(kuò)增效率高,、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍寬、重復(fù)性好,。
2. 復(fù)雜模板擴(kuò)增效果好
以 Hela 細(xì)胞為模板,，檢測(cè) High-GC 基因（G+C=72%）擴(kuò)增效果。結(jié)果顯示,，GenStar #A301 復(fù)雜模板擴(kuò)增效果好,，擴(kuò)增特異性強(qiáng)。
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